Preclinical Pharmaceutical Research
臨床前藥學研究
———— 小試工藝開發(fā)
核心優(yōu)勢
快速獲得穩(wěn)健高產的上游細胞生產工藝
理想情況下可繼續(xù)提高50%左右的產量，或改善表達產物質量
- 搖瓶/TPP/賽多利斯 2L 生物反應器進行前期上游篩選和工藝開發(fā)研究
- 10L規(guī)模進行工藝確認，鎖定最佳工藝
- 完善的工藝放大模型，可將工藝放大至50-2000L 賽多利斯/Hyclone/GE 等不同品牌生物反應器
- 具備Ambr 250高通量生物反應器，可高效進行克隆篩選和工藝表征工作
服務內容
- 擁有50L和200L生物反應器，可在白帆生物的平臺上進行放大
- 具有高質量和高效率的技術轉移和放大流程，可高效放大至2000L 生物反應器
- 根據(jù)注冊法規(guī)相關要求撰寫IND申報資料
- 我們可以根據(jù)客戶需求進行產量提升、質量改善（電荷異質性、糖型比例優(yōu)化等）
- 我們的技術平臺可以為不同階段的項目提供技術服務
核心優(yōu)勢
快速獲得穩(wěn)健高效的下游蛋白純化工藝
滿足不同單抗/雙抗/融合蛋白提高收率，雜質，純度等的開發(fā)目標
- AKTA Pure/Avant 用于平臺化層析純化工藝開發(fā)，豐富的經驗去除聚體，酸峰，堿峰等
- 應用模型進行過濾和超濾工藝開發(fā)工作
- 10L規(guī)模進行工藝確認，鎖定最佳工藝，完善的放大模型支持放大至50-2000L 生產規(guī)模
- 下游工藝表征工作，填料/濾器壽命驗證等
- 符合中美申報的去病毒驗證工作
服務內容
深層過濾
由上游細胞培養(yǎng)分泌獲得的細胞收獲液先可用微濾的方式去除細胞及細胞碎片。白帆生物下游部門通過對細胞密度、細胞活率設計深層過濾的方法，使得過濾完成的液體符合Protein A的上樣要求。
Protein A
去除細胞和細胞碎片后用Protein A親和層析填料經親和層析捕獲，把單抗從培養(yǎng)液中快速的捕獲出來，此步驟可以去除大量的HCP，折疊片段，病毒及HCD和培養(yǎng)基組份物質。Protein A柱子的成分占有下游成本的很大一部分，如何能夠高效利用Protein A的純化效果是此步驟的關鍵，白帆生物憑借多年的經驗優(yōu)化親和層析的動態(tài)載量、上樣量、淋洗步驟、洗脫步驟等參數(shù)，在此基礎上還會篩選不同的填料，既保證了蛋白的親和純化效果，同時也最高限度的提高了蛋白的回收率。
病毒滅活
選擇在這里病毒滅活，主要是因為Protein A的洗脫液是酸性的，比較利于回收液中的病毒滅活。在低pH病毒滅活時，既要保持抗體的穩(wěn)定又要保證滅活的效果。此步驟中會考察病毒滅活的pH和時間，方便生產部門決定洗脫液的hold時間。
二次深層過濾（澄清過濾）
樣品溶液經病毒滅活后，會產生一些不溶性顆粒。深層過濾在去除這些不溶性顆粒的同時，還能去除部分HCP及HCD。
離子交換層析/疏水交換層析/復合交換層析
抗體經過Protein A親和層析捕獲后，親和過程中會脫落得到的Protein A及殘留的HCP等雜質還需要進一步的去除，這時通常采用離子交換的方式，對病毒滅活后的蛋白進行流穿模式陰離子交換層析，讓雜質結合到柱子上，抗體流穿。之后再用陽離子交換層析吸附單抗，讓雜質流穿。個別抗體如雙抗、ADC還需要用到疏水作用色譜，或者離子作用和疏水作用結合的交換層析進行純化。在進行這個步驟的純化時，白帆生物系統(tǒng)的開發(fā)了緩沖液的種類，離子強度，pH，洗脫方式等過程，在填料選擇上也會通過平行對比，最終確定合適的分離柱。
納濾除病毒
根據(jù)法規(guī)要求，用于人體注射的蛋白液需要對病毒量進行嚴格的控制，在納濾除病毒時，通常會選用20nm孔徑膜。在納濾時白帆生物會充分考慮跨膜壓力，膜面積、樣品濃度及buffer等因素的影響。
UF/DF
在生成最終的DS前，需要經過UF/DF來調整DS的蛋白濃度以及把DS 置換到最終的制劑buffer里，有利于臨床的使用和DS的穩(wěn)定。
核心優(yōu)勢
快速獲得穩(wěn)定的制劑處方和制劑工藝
滿足單抗/雙抗/融合蛋白制劑開發(fā)及>100mg/ml開發(fā)需求
- 與生產需求契合的工藝開發(fā)平臺的制劑處方平臺
- 制劑處方的開發(fā)，包括緩沖體系、穩(wěn)定劑、表面活性劑等的篩選；
- 藥包材篩選，相容性研究，除菌過濾驗證
- 穩(wěn)定性研究，影響因素實驗
- 制劑工藝開發(fā)（混勻工藝，除菌工藝，凍融工藝等），工藝變更/轉移，兼顧法規(guī)要求
服務內容
工藝制劑部致力于單抗、雙抗、融合蛋白的開發(fā)，制劑平臺符合中美雙報要求，可提供從早期制劑評估、處方篩選、制劑穩(wěn)定性、工藝開發(fā)到注冊申報的一體化研發(fā)服務。同時，制劑團隊對高濃度制劑的開發(fā)擁有豐富的經驗，可快速獲得穩(wěn)定的制劑處方和制劑工藝。
制劑處方開發(fā)
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處方前研究
1.、活性物質理化特性研究（Tm, Tagg, DLS, 黏度等）
2、考察緩沖體系中的制劑溶解度，篩選制劑濃度；
3、篩選不同種類和不同pH值的緩沖液（包括組氨酸，檸檬酸，磷酸鹽等)，確定制劑緩沖體系。 -
處方篩選
根據(jù)確定的緩沖體系和濃度，運用DOE進行處方設計，通過影響因素實驗(高溫、振搖、光照、凍融等)篩選最佳的穩(wěn)定劑，確定制劑處方的成分和濃度范圍。
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處方確認
通過加速穩(wěn)定性和長期穩(wěn)定性研究，確定最終制劑處方。
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支持性研究
進行制劑和原液的包材選型和相容性研究。
Uncle檢測樣品Tm值對比圖
灌裝工藝開發(fā)
- A原液的凍融穩(wěn)定性考察
- D溶液的配制混勻工藝
- B除菌濾器的選型和過濾工藝的考察
- E兼顧不同法規(guī)要求，進行工藝確認與技術轉移
- C制劑工藝放大
- F灌裝過程相關工藝的考察
FlowCam流體成像分析系統(tǒng)
檢測用量少：0.01mL樣品即可檢測
成像直觀：可通過形態(tài)學特征，區(qū)分蛋白顆粒和硅油
檢測快速：5min內即可完成1mL樣品的檢測
凍融系統(tǒng)
檢測通量高：同時對10個樣品進行冷凍或融溶
重現(xiàn)性好：便于不同批次樣品之間的對比
可規(guī)模放大/縮?。罕阌谶M行工藝轉移